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细胞培养反应器(细胞培养反应器新华医疗)

来源:www.haichao.net  时间:2023-01-21 21:38   点击:60  编辑:admin   手机版

1. 细胞培养反应器新华医疗

光生物反应器是指能够用于光合微生物及其具有光合作用能力的组织或者细胞培养的一类装置。这种反应器和一般的生物反应器具有相似的结构,在一般的条件下都需要一定的光照、温度以及营养物质等来对微生物进行培养和对系统的环境进行调节和控制。

2. 细胞培养仪器

试剂

胰酶——消化细胞 二甲亚砜或甘油——细胞保藏 70%酒精 棉花——消毒、擦手

器材

细胞培养瓶 移液枪+枪头(一次性) 长的歪头吸管 离心管 烧杯 量筒 酒精灯 滴管架

恒温恒二氧化碳培养箱 超净工作台 冰箱(+4度 -20度) 倒置显微镜 电子天平 恒温水浴槽 离心机 超低温冰箱(-70度) 或(液氮罐(-196度)) 高压蒸汽灭菌锅

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3. 细胞培养机器

细胞培养细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术

4. 细胞培养器械

一、细胞培养的条件和要求

1.所有与细胞接触的设备、器材和溶液等,都必须保持绝对无菌,避免细胞外微生物的污染。

目前最可靠和最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。

如:玻璃制品、布类、金属制品:6.8kg20min。

橡胶制品:3.6~4.5kg10min。

培养用液,如Hanks液,水解乳蛋白:3.6~ 4.5kg10min。

实验中染菌物品和动物尸体等:6.8 kg20min。

试管、吸管等,则可采用干热灭菌;

一切不适于加热灭菌的液体,如人工合成培养液、小牛血清、胰蛋白酶等溶液,可采用过滤法除菌。

细胞培养中常用的消毒剂浓度及其使用场合

2.必须有足够的营养供应,而绝对不可有有害的物质,包括极微量的有害离子的掺入,为此必须注意器材的清洗和配液用水的质量。

细胞培养中对水的质量要求很高(见水处理)。

3.保证有适量的氧气供应。

细胞代谢需要有空气,否则细胞死亡。在用培养瓶进行静止培养,或用转瓶进行旋转培养时,只要培养的液体量不超过总容量的30%,通过与液面的空气交换,可以保证细胞有足够的氧气。当用罐子深层培养时,则必须通气,一般采用含5%CO2的空气,或根据需要将CO2、N2、O2和空气以不同比例混合,过量氧对细胞的生长也不利。

4.需随时清除细胞代谢中产生的有害产物。

细胞在代谢过程中会产生大量代谢废物,如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等,这些产物对细胞的生存有害,必须及时清除。在小量培养时,当培养基中酚红指示剂显示黄色,表示已有相当量乳酸产生,要及时更换新鲜的培养基。在大量培养时,则需随时测定葡萄糖和乳酸等含量,并调节灌流速度,使代谢产物保持在无害水平下。

5.有良好的适于其生存的外界环境,包括温度、pH、渗透压和离子浓度等。

不同的细胞对pH的要求不同,一般来说适于细胞生长的pH在6.8~7.4,过高或过低均不利于细胞生长。如上所述,细胞在代谢过程中会产生大量乳酸,使培养的pH下降。为了保持培养液的pH,常在培养液内加入各种缓冲系统,如Na2HPO4/Na2HPO4、NaHCO3/H2CO3(CO2)、Tricineglycine,以及加缓冲剂Hepes液(常用浓度为10~50mol/L).

6.及时分种,保持合适的细胞密度(见细胞传代)

5. 细胞培养技术应用

倒置显微镜(观察细胞形态,计数等),荧光显微镜(莱卡,奥林巴斯等)(免疫荧光反应观察细胞内分子的相互作用,蛋白的表达情况;)co2培养箱(热电,三洋等)(动物细胞培养专用),超净工作台(江苏安泰,热电等);CO2罐,冰箱,液氮罐,离心机以及一些其他的常用仪器

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