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悬浮细胞培养生物反应器(细胞悬浮培养技术)

来源:www.haichao.net  时间:2023-01-14 13:00   点击:83  编辑:admin   手机版

1. 细胞悬浮培养技术

1)主要有单细胞和小细胞团组成;

2)细胞具有量盛的生长和分裂能力,增殖速度快;

3)大多数细胞在形态上应具有分生细胞的特征,它们多呈等径形,核一质比率大,胞质浓厚,无液胞化程度较低.要建成这样的县浮培养体系,首先需要有良好的起始培养物——迅速增殖的疏松型愈组织.然后经过培养基成分和培养条件的选择,并经多次断代培养才能达到.县浮培养细胞经长期继代培养后,染色体常有变异现象,细胞的再生能力也有逐渐降低的趋势,然而对于以上生产有用代谢特质为目的的大量培养,这种再生能力的降低不一定有不良影响.

2. 细胞悬浮培养技术有哪些

动物细胞体外培养时,根据细胞在培养皿里生长的状态,可以分为3种类型的细胞,分别为贴壁型细胞、半贴壁型细胞或半悬浮型细胞、悬浮型细胞。

3. 细胞悬浮培养技术 成本更低

主要是,正常细胞和癌细胞相比有接触抑制现象,使其只能贴壁生长;而且癌细胞的质膜结构发生了变化,间隙连接减少或者消失,细胞通讯受阻,发生成摞的生长。

4. 细胞悬浮培养技术原理

悬浮细胞培养体系必备条件: ①悬浮培养物分散性好、细胞团小; ②细胞形状和大小大致相同; ③生长迅速。悬浮细胞倍增时间为2~3d甚至更短。可直接用悬浮细胞进行原生质体分离、杂交、次生代谢物生产等。

建立悬浮细胞系注意事项: ①合适外植体; ②疏松易碎愈伤组织; ③合适培养基; ④培养液除菌; ⑤暗或弱光悬浮培养; ⑥悬浮细胞继代与选择,保留小细胞团,直到得到均一的悬浮系为止。

植物细胞悬浮培养方法(1)分批培养(2)半连续培养(3)连续培养

5. 悬浮细胞培养方法

动物细胞贴壁培养的方法有组织块培养法和消化培养法。贴壁细胞培养方法操作步骤:

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

5.将培养板在5%CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 实验要点及说明:1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。贴壁培养的优点:容易更换培养液;细胞紧密黏附于固相表面,可直接倾去旧培养液,清洗后直接加入新培养液。容易采用灌注培养,从而达到提高细胞密度的目的;因细胞固定表面,不需过滤系统。当细胞贴壁于生长基质时,很多细胞将更有效的表达一种产品。同一设备可采用不同的培养液/细胞的比例。适用于所有类型细胞。 贴壁培养的缺点:与悬浮培养法相比扩大培养比较困难,投资大;占地面积大;不能有效监测细胞的生长;

6. 单细胞悬浮培养

可以一起生存,也存在竞争关系。

小球藻是一种单细胞悬浮藻,是地球最早的生物种类之一,本身富含蛋白质,小球藻在鱼缸里面的繁殖,需要阳光以及氨(一般常见于鱼类粪便)。

短绒藻是一种单细胞附着性藻,跟小球藻一样,都是地球的原住民了,在鱼缸里面,跟小球藻是竞争关系,同样是系统。

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