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蛋白质的常用检测方法(蛋白质的常用检测方法是什么)

来源:www.haichao.net  时间:2023-01-17 06:16   点击:211  编辑:admin   手机版

1. 蛋白质的常用检测方法是什么

蛋白质印迹(免疫印迹试验)即Western Blot物、物化免疫遗传用种实验其基本原理通特异性抗体凝胶电泳处理细胞或物组织品进行着色通析着色位置着色深度获特定蛋白质所析细胞或组织表达情况信息

蛋白质印迹由瑞士米歇尔弗雷德希物研究所(Friedrich Miescher Institute)Harry Towbin1979提尼尔·伯奈特(Neal Burnette)于1981所著《析物化》(Analytical Biochemistry)首称Western Blot蛋白免疫印迹(Western Blot)电泳离细胞或组织总蛋白质凝胶转移固相支持物NC膜或PVDF膜用特异性抗体检测某特定抗原种蛋白质检测技术现已广泛应用于基蛋白水平表达研究、抗体性检测疾病早期诊断等面

2. 蛋白质检验方法有哪些

要检验还用到质量分数为0.1 g/mL氢氧化钠溶液(A)和质量分数为0.01 g/mL硫酸铜溶液(B)先将土豆研磨后加入水制成土豆组织样液,在其中加入A2ml,摇荡均后加入双缩脲试剂B1ml,摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。其实市场上卖的土豆有两种 一中有点透明,吃起来脆,另一中颜色深些,吃起来面些前者是转基因的,增加了土豆中的蛋白质含量,但不那么好吃后者是传统土豆,好吃些,但是没多少蛋白质,营养不高

3. 蛋白质的检测方法有哪些

蛋白质是荷兰科学家格利特·马尔德在1838年发现的。

他观察到有生命的东西离开了蛋白质就不能生存。蛋白质是生物体内一种极重要的高分子有机物,占人体干重的54%。蛋白质主要由氨基酸组成,因氨基酸的组合排列不同而组成各种类型的蛋白质。人体中估计有10万种以上的蛋白质。生命是物质运动的高级形式,这种运动方式是通过蛋白质来实现的,所以蛋白质有极其重要的生物学意义。人体的生长、发育、运动、遗传、繁殖等一切生命活动都离不开蛋白质。生命运动需要蛋白质,也离不开蛋白质。1845年由一位内科医生兼化学病理学家HenryBenceJones首次描述了这种蛋白,为单克隆游离免疫球蛋白轻链(病理状态下,轻链合成过多,则游离于血清中)。蛋白质肿瘤标志是最早发现的标志物。如β2微球蛋白、免疫球蛋白。一般来讲这类标志物特异性稍差,但检测方法相对比较容易,常作常规检测项目。

4. 蛋白质的常用检测方法是什么原理

常用的蛋白质染色试剂分为已考马斯亮蓝为代表的有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。

其中考马斯亮蓝染色法的应用较为广泛,现将其与其他的蛋白质染色方法(主要是银染法)作一比较,帮助大家更好地去选择合适的蛋白质染色方法。

蛋白质的染色常用的有4类:有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。

其中有机试剂染色以考马斯亮蓝染色法(Coomasie brilliant blue,CBB)为代表,在蛋白质分析中常用,但对低丰度蛋白质的显现较差;银染灵敏度虽高,却常与质谱不兼容;荧光染色以SYPRO试剂为主,蛋白质检测灵敏度高,能兼容质谱,但由于需要配备特殊的检测仪器及试剂的昂贵,未被作为常规方法使用;而同位素显色则存在安全性和操作局限性等问题。

因此,筛选简便、节约、检测灵敏度高、质谱兼容的蛋白质着色法是蛋白质组研究所需。

由于考马斯亮蓝染色法的广泛运用,近年来就考马斯亮蓝染色法在提高其灵敏性方面研究者们作了许多改进,方法众多,评价不一。

我们在作双向凝胶电泳时,将常用的几种考马斯亮蓝染色法及银染进行了比较,并就其染色影响因素作出分析。……详细资料请参考:on http://www.bio1000.com/experiment/protein/351913.html

5. 常见蛋白质测定的方法有哪些

●方法:平板等电聚焦

●原理:蛋白质分子在含有载体两性电介质形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。但不自是按照等电点不同被分离。

●仪器:Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell

●样品要求:

●液体:浓度>3mg/ml;体积>200ul;固体:质量>200ug

●样品纯度>90%;含盐量<3 0mM;分子量:一般要求大于1000Da

●常见影响测试情况:

1、蛋白质纯度不足

2、含盐量过高

3、蛋白质分子量太小,导致无法固定染色

6. 蛋白质的常用检验方法

A、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜,用来观察细胞内的脂肪颗粒,A正确;

B、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热,要注意使用方法,先加A液再加B液,B正确;

C、可溶性还原糖的鉴定,应用水浴加热产生砖红色沉淀,C错误;

D、使用斐林试剂要现配现用,甲乙液等量混均使用,D正确.

故选:C.

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