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蛋白质简单检测方法(蛋白质的测试方法)

来源:www.haichao.net  时间:2023-01-17 13:36   点击:224  编辑:admin   手机版

1. 蛋白质的测试方法

Western-blot是一种半定量的检测手段。个人认为如果要通过灰度值来计算蛋白浓度,那就是和内参来做对比,因为内参的浓度是已知且单一条带的蛋白样品。通过待测样品盒内参样品灰度值做对比可以算出待测样品大概的浓度。个人意见,仅供参考,因为一般检测蛋白含量的做法都是通过BF,BCA,Lowry之类的检测方法来测的。

2. 蛋白质的测试方法是什么

1.DNA分子杂交技术检测的是转基因生物的DNA是否插入了目的基因。将转基因生物的基因组DNA提取出来,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记,以此作为探针,使探针与基因组DNA杂交,如果显出杂交带,就表明目的基因已插入染色体DNA中。

2.分子杂交技术检测目的基因是否转入出了mRNA。从转基因生物中提取出mRNA,用标记的目的基因作为探针,与mRNA杂交,如果显出杂交带,则表明目的基因转入出了mRNA。

3.抗原-抗体杂交检测目的基因是否翻译成蛋白质。从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交,若有杂交带出现,表明目的基因已形成蛋白质产物。

3. 蛋白质怎么测试

牛奶检测,一般检测乳脂含量,比重,蛋白质含量,乳糖,糖感官评定,理化检验,微生物,掺杂乳,水分、溶解度和杂质度等!用的设备一般乳稠计,罗兹哥特里抽脂瓶,毛氏抽脂瓶,冰点仪,盖勃乳脂计,PLC杂质度过滤机,索式抽脂器等。

4. 蛋白质测定有哪些方法

最简单的方法,也是人们最耳熟能详的方法,就是对物体进行灼烧,看是否能闻到烧焦的羽毛味,如果可以闻到烧焦的羽毛味,那么证明有蛋白质的存在。

中学的化学课上也教过我们不少的方法,比如说吧蛋白质和浓HNO3进行反应,如果能够变性产生黄色不溶性物质,那么该物体是蛋白质。

还有一种方法就是把含有蛋白质的屋子磨成浆然后过滤,取滤液进行测试,可以先在滤液中加氢氧化钠(NaOH),然后再加入双缩脲试剂,如果出现紫色反应,就为蛋白质。

除了比较通用的方法,还有一些高大上的方法也可以检测鉴定蛋白质,比如通过质谱仪,它的原理主要是根据肽质量指纹图谱与蛋白质数据库中蛋白质的理论PMF进行比对,从而鉴定蛋白质。除了比较通用的方法,还有一些高大上的方法也可以检测鉴定蛋白质,比如通过质谱仪,它的原理主要是根据肽质量指纹图谱与蛋白质数据库中蛋白质的理论PMF进行比对,从而鉴定蛋白质。

5. 蛋白质检测的方法

健康的肌肉是由约73%的水和27%的蛋白质组成。所以体脂秤应该大致就是把测得的肌肉率减去水分率得出了蛋白质比率。

你去仔细观察一下你体脂称的数据,可以发现,肌肉率 - 水分率 = 蛋白质率(我体脂秤给的是“肌肉量”,只需用它除以“体重”,即可得“肌肉率”)。

6. 蛋白质怎么测

A、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜,用来观察细胞内的脂肪颗粒,A正确;

B、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热,要注意使用方法,先加A液再加B液,B正确;

C、可溶性还原糖的鉴定,应用水浴加热产生砖红色沉淀,C错误;

D、使用斐林试剂要现配现用,甲乙液等量混均使用,D正确.

故选:C.

7. 蛋白质的测定方法

常见的蛋白质鉴定方法有:

一、最简单的方法就是对所要鉴定的物体进行灼烧

二、使用化学药剂进行化学反应来鉴定蛋白质

三、较为精准的方法是使用仪器进行蛋白质鉴定,如质谱仪等

在生物学研究中经常会遇到一些关于蛋白质鉴定的问题,如单一蛋白质或者简单混合物的鉴定;对单一蛋白质的序列分析等。这一类蛋白质鉴定,在精密度上要求较高,所以几乎都是采用质谱仪器,来对蛋白质进行精密鉴定。

质谱技术是鉴定蛋白质的其中一种平台技术。可用到的质谱仪有Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap Velos质谱仪,以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪。所在鉴定机构的不同,在硬件品牌的使用上也会有不同。

蛋白质鉴定的流程一般分三大步:蛋白质提取、纯化、鉴定。这个流程是一个将蛋白质层层“解剖”的过程,从中我们可以对蛋白分子量进行测定,蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质进行鉴定,非变性质谱分析以及Pull-down靶蛋白质谱鉴定等,较为细致的去分析蛋白质中的各种物质、性质等。

8. 蛋白的检测方法

常用的蛋白质染色试剂分为已考马斯亮蓝为代表的有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。

其中考马斯亮蓝染色法的应用较为广泛,现将其与其他的蛋白质染色方法(主要是银染法)作一比较,帮助大家更好地去选择合适的蛋白质染色方法。

蛋白质的染色常用的有4类:有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。

其中有机试剂染色以考马斯亮蓝染色法(Coomasie brilliant blue,CBB)为代表,在蛋白质分析中常用,但对低丰度蛋白质的显现较差;银染灵敏度虽高,却常与质谱不兼容;荧光染色以SYPRO试剂为主,蛋白质检测灵敏度高,能兼容质谱,但由于需要配备特殊的检测仪器及试剂的昂贵,未被作为常规方法使用;而同位素显色则存在安全性和操作局限性等问题。

因此,筛选简便、节约、检测灵敏度高、质谱兼容的蛋白质着色法是蛋白质组研究所需。

由于考马斯亮蓝染色法的广泛运用,近年来就考马斯亮蓝染色法在提高其灵敏性方面研究者们作了许多改进,方法众多,评价不一。

我们在作双向凝胶电泳时,将常用的几种考马斯亮蓝染色法及银染进行了比较,并就其染色影响因素作出分析。……详细资料请参考:on http://www.bio1000.com/experiment/protein/351913.html

9. 蛋白质的测试方法有哪几种

主要用探针检测mRNA或用抗体检测出表达的蛋白质(转录水平上对特异mRNA的检测和翻译水平上对特异蛋白质的检测)

详见下面:

外源基因转录水平的鉴定

基因表达分为转录及翻译两阶段,转录是以DNA(基因)为模板生成mRNA的过程,翻译是以mRNA为模板生成蛋白质的过程,检测外源基因的表达就是检测特异mRNA及特异蛋白质的生成。所以基因表达检测分为两个水平:即转录水平上对特异mRNA的检测和翻译水平上对特异蛋白质的检测。转录水平上的检测主要方法是Northern杂交,它是以DNA或RNA为探针,检测RNA链。和Southern杂交相同,Northern杂交包括斑点杂交和印迹杂交。

也可用RT-PCR(reverse transcribed PCR)方法检测外源DNA在植物体内的转录表达。其原理是以植物总RNA或mRNA为模板进行反转录,然后再经PCR扩增。如果从细胞总RNA提取物中得到特异的cDNA扩增条带,则表明外源基因实现了转录。此法简单、快速,但对外源基因转录的最后决定,还需与Northern杂交的实验结果结合。

外源基因表达蛋白的检测

表达蛋白的检测方法有三种:①生化反应检测法:主要通过酶反应来检测;②免疫学检测法:通过目的蛋白(抗原)与其抗体的特异性结合进行检测,具体方法有Western杂交、酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫沉淀法;③生物学活性的检测。

Western杂交是将聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分离抗原(Antigen)固定在固体支持物上(如硝酸纤维素膜,NC膜)。不同分子量大小的蛋白质在凝胶中迁移率不同,据此可确定特定的抗原存在与否以及相对丰度,或者蛋白质是否遭到降解等。蛋白质电泳后转到NC膜,放在蛋白质(如牛血清蛋白BSA)或奶粉溶液中,温育,以封闭非特异性位点,然后用含有放射性标记或酶标记的特定抗体杂交,抗原-抗体结合,再通过放射性自显影或显色观察。

10. 蛋白质的测试方法有哪些

先找一个杯子,盛住自己的尿液,然后把试纸从盒子里取出,右手拿着试纸的末端,把试纸放入尿液中浸泡1~2秒拿出,试纸两侧多余的尿液可以用纸巾蘸干净,然后根据说明书上的对比时间,或者直接按照试纸上颜色反应的深浅,找出相对应的色标,在他的色表里面会有对应的数值,这样就会得出检测的结果。

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