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超声波碎冰(冰浴超声破碎细胞)

来源:www.haichao.net  时间:2023-01-15 15:36   点击:149  编辑:admin   手机版

1. 冰浴超声破碎细胞

发光是因为用了发光物质标记的。 利用液氮对组织进行研磨,从而破碎细胞。细胞提取液中含有的SDS溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来。EDTA抑制DNA酶的活性。再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白,得到的DNA溶液经乙醇沉淀。 取4g新鲜叶片,在液氮中研磨成粉末状(越细越好)。 2.转移至50mL离心管中,加人16mL细胞提取液,充分混匀。65 ℃水浴保温20min。 3.从水浴中取出离心管,加人5mL5mol/LKCl溶液,混匀,冰浴20 min。 4.4000r/min离心20min。 5.将上清液转移到另一50mL离心管中。 6.加等体积酚/氯仿混匀,12OO0r/min离心5min,取上清。 7.加等体积氯仿,混匀,12000r/min,离心5min,取上清。 8.加人0.6-1倍体积的异丙醇(沉淀DNA),混匀。 9.离心获得沉淀,70%乙醇洗3次。风干沉淀。 10.加人500μLTE缓冲液,溶解DNA。 11.取3μL上清液,琼脂糖凝胶电泳检测DNA浓度、质量。 最后用EB跑电泳就可以看到你在电视上看到的发光的dna了

2. 水浴超声能破坏细胞吗

sds溶解方法是将20g SDS溶解于60mL 左右双蒸水,定容至100mL。

因为20% 的SDS属于高浓度,在低温下难溶解,所以溶解时可以水浴加热至 60或65摄氏度左右,有助溶作用。也可以使用超声波加速溶解方法,但效果不太好。还是水浴加热助溶比较好。

3. 超声细胞破碎仪破碎细菌

超声波纳米材料分散器和细胞破碎仪都是利用超声波的空化效应来运行工作的,在工作原理上,二者是相同的。但是纳米材料分散器是专门针对分散团聚的颗粒而研发生产的仪器,在效果上会更好

4. 细胞超声破碎仪

  超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过换能器转换为声能,这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡,这些小气泡迅速炸裂,产生的象小炸弹一样的能量,从而起到破碎细胞等物质的作用。

5. 超声清洗仪破碎细胞

超声波细胞破碎仪就是将电能通过换能器转换为声能,这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡,这些小气泡迅速炸裂,产生的象小炸弹一样的能量,从而起到破碎细胞等物质的作用。

超声波细胞破碎仪具有破碎组织、细菌、病毒、孢子及其它细胞结构,匀质、乳化、混合、脱气、崩解和分散、浸出和提取,加速反应等功能,故广泛应用于生物、医学、化学、制药、食品、化妆品、环保等实验室研究及企业生产。

6. 细胞裂解超声破碎

细胞凋亡是细胞的程序性死亡,本质是由细胞控制表达特殊基因起到“劝说”作用,使细胞程序性自杀。而细胞坏死多由外界因素造成,属细胞的“不可抗力”,非自主性死亡。如果提到裂解之类的也属于凋亡,裂解是细胞的自主选择性“自杀”。

7. 超声破碎细胞方法

物理破碎法:指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。

1.用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂(借助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器)。

机制:可能与强声波作用溶液时,气泡产生、长大和破碎的空化现象有关,空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解。

超声波破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度和细胞类型等。(使用时注意降温,防止过热)。

2. 高压破碎:细胞悬浮液从高压室的环状隙喷射到静止的撞击环上,被迫改变方向经出口管流出。此过程中细胞经历了高速造成的剪切的碰撞及高压到常压的变化,从而破碎释放内含物。

这是一种温和的、彻底破碎细胞的较理想的方法。

3. 反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎

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