1. 检测蛋白质的试剂
鉴别蛋白质,淀粉,肥皂溶液可以有2种常用方法. 1.用浓硝酸鉴别,分别取样,在样品中加入适量浓硝酸,变黄的是蛋白质溶液(黄蛋白反应),无明显变化的是淀粉,有固体析出的是肥皂水: C17H35COONa+HNO3----->C17H35COOH(固体)+NaNO3 2.先加碘水,变蓝的是淀粉. 将未变蓝的两种溶液中鼓吹入空气(或强振荡），有气泡产生的是肥皂溶液,无明显变化的是蛋白质溶液.
2. 蛋白质检测实验
双缩脲法
用于鉴定蛋白质的分析方法
双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋白质单位1-10mg。
基本信息
中文名
双缩脲法
外文名
Biuret method
成分
氢氧化钾、硫酸铜、酒石酸钾钠
名词解释
双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。
双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾，可延长试剂的使用寿命。
基本概况
实验原理
双缩脲（NH2CONHCONH2）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能够以一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。
此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差，不适合微量蛋白的测定。
试剂与器材
1. 试剂：
1.
1. 试剂：
（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制，酪蛋白用0．05N NaOH配制。
（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（CuSO4·5H2O）和6.0克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。此试剂可长期保存。若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。
2. 器材：
1.
2. 器材：
可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。
操作方法
1.
标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后，在室温（20~25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横坐标，光吸收值为纵坐标绘制标准曲线。
2、样品的测定：取2~3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。
3. 蛋白质检测方法
1.双缩脲法是检测蛋白质的一个比较简单的方法。这种检测方法的灵敏度比较低一点，但是速度却比较快，一般用20到30分钟的时间就能够有效地检测出人体内蛋白质的含量了。不过通过双缩脲法只能够检测出蛋白质含量多少，并不能够清楚的判断出是哪种蛋白质。因为这种方法检测的时候不同蛋白质的显色程度是相似的，所以就很难辨别了。
2、酚试剂法
取6支试管分别标号，前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，不加标准蛋白溶液，在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。
3.硫酸铜法传统的用于检测人体蛋白质的方法，具体的检测过程如下。首先取0.2克的硫酸铜以及6克的硫酸钾，然后将适量的蛋白质用滤纸包裹好后，加入20ml的硫酸。然后在电炉子上进行融化，等到蛋白质中没有任何碳化颗粒，并且处于澄清状态下的时候在拿下来晾冷。再加入过氧化氢，直到把瓶中的蛋白质冲洗干净为止，再继续消化30分钟，就能够判断出人体的蛋白质了。
4. 蛋白检测方法
要检验还用到质量分数为0.1 g/mL氢氧化钠溶液（A）和质量分数为0.01 g/mL硫酸铜溶液（B）先将土豆研磨后加入水制成土豆组织样液，在其中加入A2ml，摇荡均后加入双缩脲试剂B1ml，摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。其实市场上卖的土豆有两种 一中有点透明，吃起来脆，另一中颜色深些，吃起来面些前者是转基因的，增加了土豆中的蛋白质含量，但不那么好吃后者是传统土豆，好吃些，但是没多少蛋白质，营养不高
5. 蛋白质测定的方法
1. isothermal titration calorimetry （ITC），直接测定两个蛋白互相作用的Kd值。
2. AUC，也就是超速离心分析。可以直接测定两个蛋白相互作用与否。
3.SAXS, 也就是X-ray小角散乱。不过技术难度比较大一些。
4. 溶液NMR，这个应该可以但不太了解。
5. 结晶再解构，这个不用解释了。比较究极一点。
6.cryo-EM，同上。比较究级的方法。
7. 最简单常用的，gel-filtration，观察有没有oligomer的分子量峰出现。但是相互作用弱的话很难观测到。
8.更简单常用的nativePAGE，同上，相互作用弱则很难观测到。
9.用氨基架桥试剂共价连接，然后SDS-PAGE。看看有没有oligomer的带。暂时想到这些，跨度比较大。
6. 怎样检测蛋白质
A、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜，用来观察细胞内的脂肪颗粒，A正确；
B、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热，要注意使用方法，先加A液再加B液，B正确；
C、可溶性还原糖的鉴定，应用水浴加热产生砖红色沉淀，C错误；
D、使用斐林试剂要现配现用，甲乙液等量混均使用，D正确．
故选：C．