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蛋白浓度的检测(蛋白浓度检测试剂盒)

来源:www.haichao.net  时间:2023-01-22 04:23   点击:287  编辑:admin   手机版

1. 蛋白浓度检测试剂盒

蛋白质用双缩脲试剂检测。 双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。会遇到蛋白质显紫色。 双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。

当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。

可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。

双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境,因此它可被其他碱,如氢氧化钠所代替。

向试剂中加入碘化钾,会延长试剂的使用寿命。

酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。

2. 蛋白浓度检测试剂盒怎么用

仪器有分光光度计 台式离心机 精密天平 三角瓶 烧杯 量筒 移液器

Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。

此法的显色原理与双缩脲法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色(钼兰和钨兰的混合物)。在一定的条件下,蓝色深度与蛋白的量成正比。

3. 蛋白浓度检测试剂盒使用方法

比如的试剂盒检测蛋白质的浓度范围是10--100nmol/ml,而你的三个样品浓度为100,200,和300.那么你检测到的数值是一样的,都是试剂盒检测的最大值100。

4. 白蛋白检测试剂盒

1.回收 COD 废液中硫酸汞 以美国哈希公司生产的 COD 小分管试剂为例,将已使用过的 COD 消解管内白色沉淀硫酸 汞进行分离。将管内废液连同白色沉淀转移到到 250 毫升烧杯中,同时重复用废液倒满 10 毫升 COD 管,再准备 2 个 50 毫升小烧杯,分别装好纯水,将纯水倒入 COD 管洗管内壁,重复 两次或以上,使其中溶液尽可能全部转移。静置后上清液倒入试剂瓶中,烧杯中白色沉淀即为 硫酸汞结晶。

2.将 COD 废液中 Cr6+还原为 Cr3+ 将上述上清液置于电炉上加热,将经研磨成粉状后的硫酸亚铁铵(或硫酸亚铁)加入此溶 液中,使溶液成蓝绿色即止,即 Cr6+还原为 Cr3+。

3.回收氯化银 把上清液转移到烧杯中,在 75 -100℃不断搅拌下加热煮沸。

5. 蛋白浓度检测试剂盒图片

首先,你的实验环境、实验材料是否洁净,相关仪器设备移液枪之类的是否已标准计量?

其次,你可以直接购买现成的商品化核酸提取试剂盒,没必要自己去配CTAB法所需试剂,常见试剂盒供应商如Promega、天根都用过,好用!这些试剂盒配套的设备是水浴锅(或金属浴)、离心机(配1.5ml转子)、超低温冰箱(-20度左右)。

第三,提取后的核酸最好用核酸蛋白测定仪检测一下核酸的浓度和纯度,看看你提取的核酸质量如何,然后按转基因检测标准来配置用于下一步PCR反应的核酸浓度。

最后,在洁净区域配置PCR反应体系,我一般在超净工作台操作,相关试剂置于冰上,配置好之后要保证PCR管管壁不挂液、管底无气泡方可放入PCR仪中进行反应。

大概这些吧

6. 蛋白浓度检测试剂盒荧光

如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器

1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水

2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop

3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。

4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。

5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。

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